【摘要】目的探讨小型猪肾脏血管的三维可视化建模方法及其应用意义。方法选取1对新鲜正常离体小型猪肾脏，分别采用“环氧树脂-氧化铅”填充剂灌注腹主动脉(红色)和“环氧树脂-二氧化钛”填充剂灌注后腔静脉(黄色，结扎右肾静脉)并制作铸型，然后行128层螺旋CT薄层扫描采集二维图像数据集，利用Mimics19.0软件进行血管阈值分割和重建小型猪肾脏血管三维可视化模型。结果利用Mimics19.0软件成功重建小型猪肾脏血管三维可视化模型，该模型肾动、静脉血管的分布及走行与其铸型标本相一致。且通过血管阈值分割来显示肾动、静脉或单独显示肾动脉，效果较为理想，立体感强。结论基于血管铸型标本重建有效分割的小型猪肾脏血管三维可视化模型，为泌尿外科研究和手术虚拟训练奠定仿真平台基础和提供重要的指导意义。
【关键词】肾脏血管;三维重建;造影剂;铸型标本;小型猪
小型猪是人类疾病研究的重要替代实验动物，由于其肾脏的解剖结构和生理功能与人类相类似，常作为泌尿外科实验研究和手术模拟训练的动物模型。近年来，随着转基因技术的快速发展和异种移植技术的不断成熟，小型猪肾脏作为人类肾移植的供体可能性越来越明显[1-2]。因此，深入了解小型猪肾脏血管的分布、走行及血供情况等解剖结构对人类肾移植研究具有重要应用价值。目前，有关猪肾脏血管的解剖结构及血管铸型观察已有相关报道[3-4]，而有关肾脏血管的三维可视化建模研究报道甚少。鉴于此，本研究应用血管重建技术和Mimics分割技术构建小型猪双肾血管数字化三维模型，并通过阈值分割更好显示肾脏血管形态学结构，为人类异种移植提供了血管解剖学依据。
1材料和方法
1.1实验动物
选取外科实验后新鲜广西巴马小型猪标本1只(死后4h内)，雌性，23kg，由肇庆医学高等专科学校动物实验中心提供[SCXF(粤)2015-0056]。本实验室具有普通级实验动物使用许可证号[SYXK(粤)2016-0013]，本研究经肇庆医学高等专科学校动物实验中心伦理委员会批准实施[(肇医专)2018-009]。
1.2实验方法
1.2.1标本处理
首先打开腹腔，在腹后壁处找到左、右肾脏并检查其完整性;然后在腹主动脉(发出肾动脉处)和后腔静脉(发出肾静脉处，结扎右肾静脉)的上方1.5～2cm处分别插管[5]，并用50mL一次性塑料注射器不断抽取5%肝素生理盐水对插管内动静脉血管进行推注冲洗，待肾静脉流出清澈液体即停。最后待肾脏标本在原位静置12～18h后，用50mL一次性塑料注射器不断抽取空气注入插管内以检查插管是否存在漏气，若出现外漏，可在插管链接处滴注502胶水黏住加固。
1.2.2小型猪肾脏动静脉血管铸型标本制作
采用环氧树脂混合金属氧化物造影剂方式进行灌注制作小型猪肾脏动静脉血管铸型标本[6-7]，具体为:先采用“环氧树脂-氧化铅”(100mL∶113g)灌注腹主动脉(红色)，边灌注边观察两侧肾脏标本表面颜色变化，当出现部分红色小斑点应即停止灌注;然后同理采用“环氧树脂-二氧化钛”(100mL∶24g)填充剂灌注后腔静脉(黄色，结扎右肾静脉)，边灌注边观察左侧肾脏标本表面颜色变化，当出现部分黄色小斑点应即停止灌注。最后让标本静置8～12h填充剂完全硬化后放入37%浓盐酸腐蚀，5～7d后将标本取出用自来水反复冲洗干净，并进行局部修剪，即成小型猪肾脏动静脉血管铸型标本。
1.2.3CT扫描与三维建模
采用西门子128层螺旋CT对小型猪肾脏动静脉血管进行薄层扫描。扫描参数:管电压120kV，管电流250mA，旋转时间每圈0.5s，准直宽度64×0.625mm，重建层厚0.5mm，重建层距0.3mm，螺距0.915mm，视野350mm，矩阵512×512，扫描所获得DICOM格式数据集(容量0.88G)导入Mimics19.0软件进行三维图像重建。通过Thresholding功能调整阈值分割显示肾动脉、肾静脉，然后使用Calculate3D工具对不同分割蒙板进行计算，以构建不同阈值的小型猪肾脏动静脉三维可视化模型。
2结果
2.1小型猪肾脏血管铸型观察
铸型结果显示:小型猪双侧肾脏血管轮廓明显，形态充盈饱满。右侧肾动脉和肾静脉的各级分支伴行且互相吻合形成血管网，左侧肾动脉粗细分明、稀疏有度，能清楚地显示前支、后支、叶间动脉、弓状动脉的立体构筑及小叶间动脉分支间吻合关系，立体感强(图1)。
2.2小型猪肾脏血管三维可视化模型
将CT扫描采集的DICOM数据导入Mimics19软件成功重建小型猪肾脏血管三维可视化模型(图2)，并通过调整阈值范围分割显示肾脏动、静脉及其分支，具体为:当阈值范围调整为552～3071HU时，重建三维模型形态逼真、立体感强，能清晰地观察双侧肾动脉及其分支(前支、后支、叶间动脉及弓状动脉等)，右侧肾静脉及分支(后干静脉、叶间静脉及弓状静脉等)，与铸型标本血管走行及分布相一致。当阈值范围调整为1223～3071HU时，重建三维模型只显示双侧肾动脉及其主要分支(前支、后支、叶间动脉等)，弓状动脉及其以下小动脉分支消失。同时右侧肾静脉及其分支也消失。当阈值范围调整为2879～3071HU时，重建三维模型仅显示双侧肾动脉主干，其动脉分支消失。
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3讨论
3.1小型猪肾脏血管三维可视化建模方法
血管三维可视化建模是通过CT或MRI造影重建的虚拟立体模型，对深入了解实验动物血管内部结构具有巨大的优势。CT图像采集原理是基于X射线穿透物质能力来区分不同密度的物质，即血管内造影剂密度越大，X射线越难穿透，三维成像越清晰。目前，有关文献报道以人类(或动物)肾动脉三维重建为主，如王占宇等[8]采取CTA(造影剂为碘普罗胺)采集人体肾动脉数据，并以VR、MIP等形式重建其三维图像;同理，彭卫华等[9]也采用造影剂(泛影葡胺钠)灌注离体猪肾动脉并通过CT扫描重建VR、MIP等三维图像。而对肾静脉或肾动静脉重建研究方法甚少，这跟CT阈值原理和造影剂密度存在密切的关系。鉴于此，本研究采用两种不同密度差造影剂灌注制作铸型标本后经CT扫描和Mimics阈值分割重建不同小型猪肾脏血管三维可视化模型。其优势如下:
(1)选择不同密度差造影剂:肾动脉灌注造影剂氧化铅(9.63g/cm3)，是金属造影剂密度最大，显影度最高，是血管造影术的“金标准”，但是伪影大;肾静脉灌注造影剂二氧化钛(4.26g/cm3)与骨骼密度(4.22g/cm3)相近，显影度中度，伪影较小。
(2)先铸型后重建:先将氧化铅和二氧化钛两种不同密度金属造影剂粉末分别加入填充剂并搅拌均匀，待铸型标本硬化后，造影剂就可以很好均匀分散于各级血管铸型内，CT扫描重建三维图像清晰度高、血管连续性好，且与铸型标本的血管走行及分布相一致。
(3)阈值分割:通过Mimics软件阈值调整可以完整显示肾脏动、静脉，也可以单独显示肾动脉，血管分割效果较理想。因此，密度差造影剂灌注是一种分割小型猪肾脏动静脉血管分割显示的好方法，效果明显。
3.2小型猪肾脏三维可视化模型的应用意义
近年来，随着腔镜下肾部分切除术(LPN)的广泛开展，外科医生的临床实践经验是LPN手术成败的关键因素。由于受医学伦理限制，经验不足的年轻外科医生或实习生不能直接在患者身上直接进行手术或练习。相关研究报道显示[10-11]，在小型猪开展的肾部分切除术的试验方法和结果与患者手术结果相似度90%以上，表明小型猪肾三维模型成为泌尿外科医生手术模拟培训理想的动物模型。本研究基于小型猪肾脏血管铸型重建其三维可视化模型，具有以下重要应用意义:
(1)血管模型分割:重建肾动静脉三维模型可以通过调整阈值范围间距分割肾动脉和肾静脉。当阈值范围间距不断缩小，最先消失是造影密度小的肾静脉及其分支血管，然后是肾动脉及其分支，最后仅剩肾动脉主干。其特别之处在于血管分显示基于解剖原位分割显示，这样更接近真实的手术环境。
(2)实体和虚拟结合:血管铸型是一种较好显示动物器官内部血管分布及走行的好方法[12]，能清楚地显示浅层右侧肾脏动、静脉吻合关系及左侧肾动脉走行及分布情况，而不足之处由于铸型细小血管过于丰富对于被覆盖部分或深层血管难于观察。而其三维模型可以在计算机Mimics三维空间内以任意角度、任意方向旋转观察和测量，较大地弥补铸型标本观察的不足，这种优势是铸型所无法比拟的。
(3)3D打印实物模型:3D打印技术是快速成形技术之一，在医疗领域发挥其独有优势[13]。外科医生在术前或虚拟手术训练中，可以根据手术需要重建多个分割阈值不同的小型猪肾脏血管三维可视化模型，并连接3D打印设备就可以打印出等比例相一致的3D实物模型，且批量生产，便于术前观察、分析和讨论，有利于提高手术成功率和积累临床经验。
综上所述，基于血管铸型标本重建小型猪肾脏血管三维可视化模型，作为在原位分割单独或整体显示肾动静脉血管的有效方法，为泌尿外科研究和手术虚拟训练奠定仿真平台基础和提供重要的指导意义。
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