摘要: 目的 了解舰艇官兵执行远航任务前期、中期、后期皮肤细菌的变化特点，为舰艇官兵皮肤病和其他疾病的防治提供依据。方法 用无菌采样拭子采集脐周皮肤标本 150 份，进行细菌培养和分纯，取纯培养细菌进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪( MALDI - TOF - MS) 鉴定。结果 从 150 份脐周皮肤标本分离出病原菌 14 种 47 株，主要病原菌有金黄色葡萄球菌、产酸克雷伯菌、阴沟肠杆菌和铜绿假单胞菌; 分离出栖居菌 11 种 181 株，主要栖居菌有表皮葡萄球菌、人葡萄球菌、溶血葡萄球菌和头状葡萄球菌。任务后期与前期比较，病原菌数增加，栖居菌数减少。医疗组与机电组比较，任务前期、中期、后期脐周病原菌检出数之间差异有统计学意义( P < 0. 05) ，栖居菌检出数之间差异无统计学意义( P > 0. 05) 。结论 远航期间舰艇官兵容易发生疲劳，免疫功能下降，皮肤正常栖居菌减少，而病原菌增加，容易发生皮肤病及其他疾病。
关键词: 病原菌; 栖居菌; 皮肤病; 远航; 舰艇官兵
人体皮肤上寄居着许多细菌，但在正常情况下，大多数皮肤细菌对人体无害，并且通过防止有害微生物感染而保持皮肤健康。在成人人体表面和内部，微生物细胞总重量仅为人体重量的 1% ～ 2% ，但其数量远远超过人类细胞，仅生活在皮肤上的细菌数量就是人体细胞的 10 倍左右[1]。近年来，“人类微生物组计划”( human microbiome project，HMP) 对人体内共生微生物群落进行基因测序和功能分析，其中研究皮肤微生物基因以帮助人们了解皮肤微生物与人类健康的关系，发现新的检测人体健康状况和防治疾病的方法[2 - 3]。当机体抵抗力降低或皮肤破损时，皮肤上微生物就会侵入皮肤或体内造成感染，如皮肤病、伤口感染等。本研究意在探讨远航期间舰艇官兵皮肤细菌的变化特点，为提高远航舰艇官兵的卫勤保障和海战伤细菌感染的救治提供依据。
1 材料与方法
1. 1 样本 某舰官兵执行远航任务4 个月，选取医疗组 25 人，机电组 25 人。用无菌生理盐水润湿无菌采样拭子，在肚脐周围涂抹 3 次 ～ 5 次，放入含脑心浸出 液肉汤的采样管中，混匀后放 - 20 ℃ 冰箱保存。在远航任务前期、中期、后期各采样50 份，共采集标本 150 份。
1. 2 仪器与试剂 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪 ( Bruker microflexTM MALDI - TOF - MS Bio Typer TM ) ，德国布鲁克公司生产。脐周细菌采样及运送系统，包括 92 mm × 16 mm 细菌采样管( 内含脑心浸出液肉汤 3 ml) 和无菌采样拭子( 批号: MT0101) ，由北京友康基业生物科技有限公司生产。培养基有血琼脂平板( 批号: PB0115A) 、中国蓝琼脂平板( 批号: PO5060A) 、巧克力琼脂平板( 批号: PB0136A) 和沙保罗琼脂平板( 批号: PO0160A) ，均为 Oxoid 公司生产。
1. 3 细菌质控菌株 细菌质控菌株包括大肠埃希菌 ATCC25922、铜绿假单胞菌 ATCC27853 和金黄色葡萄球菌 ATCC25923。
1. 4 方法
1. 4. 1 细菌培养和分离 将冷冻保存的标本放室温解冻，分别接种血琼脂平板、中国蓝琼脂平板和沙保罗琼脂平板，放 35 ℃孵箱培养 24 h ～ 48 h，根据细菌在不同培养基上的生长情况和菌落的不同特征进行细菌分纯，得到纯培养细菌[4 - 6]。
1. 4. 2 细菌鉴定 取血琼脂平板、中国蓝琼脂平板和沙保罗琼脂平板上的纯培养细菌进行质谱仪鉴定。 1. 5 统计学处理 实验数据采用 SPSS 13. 0 统计软件进行方差分析和 q 检验，P < 0. 05 为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 任务前期、中期、后期脐周病原菌种类和数量检测结果 从 150 份脐周标本分离出病原菌 14 种 47 株 ( 表 1) ，分离数量较多的病原菌有金黄色葡萄球菌、产酸克雷伯菌、阴沟肠杆菌和铜绿假单胞菌。
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2.2 任务前期、中期、后期脐周栖居菌种类和数量检测结果 从 150 份脐周标本分离出栖居菌 11 种 181 株 ( 表 2) ，脐周分离出的主要栖居菌有表皮葡萄球菌、人葡萄球菌、溶血葡萄球菌和头状葡萄球菌。
2. 3 任务前期、中期、后期医疗组与机电组官兵脐周病原菌和栖居菌数量变化 从任务前期、中期、后期医疗组 与 机 电 组 脐 周 病 原菌和栖居菌数量变化 ( 表 3) 可知，任务中期、后期与前期比较，病原菌和栖居菌数量在中期减少、后期增加; 医疗组与机电组比较，在任务前期、中期、后期脐周病原菌检出数之间差异有统计学意义( P < 0. 05) ，栖居菌检出数之间差异无统计学意义( P > 0. 05) 。
2. 4 任务前期、中期、后期脐周病原菌种类变化 从医疗组与机电组在任务前期、中期、后期脐周病原菌种类变化( 表 4) 可知，任务后期与前期比较，医疗组和机电组病原菌检出种类增加; 在任务中期、后期，机电组病原菌检出种类比医疗组多。
2. 5 任务前期、中期、后期脐周栖居菌种类变化 从医疗组与机电组在任务前期、中期、后期脐周栖居菌种类变化( 表 5) 可知，在任务前期、中期、后期，机电组脐周栖居菌检出种类比医疗组少。
3 讨 论
由于皮肤与外界环境直接接触，皮肤上存在多种微生物，其中有一部分微生物是长期适应皮肤环境的结果，可长期寄生在人体皮肤表面而成为正常菌群。当人体免疫功能正常时，皮肤细菌对人体通常无害，有些细菌对人体还有利。当皮肤受损时，皮肤表面的细菌可通过伤口侵入到皮肤下层造成感染。如皮肤未破损，但其防御功能降低时，细菌也可以穿过皮肤进入深部组织造成感染。皮肤微生物是一个大的生态系统，有些皮肤病是由于皮肤生态系统的变化所引发的反应，或细菌、真菌和其他微生物之间的平衡被打破所致。皮肤微生物随季节、气候、性别和年龄的不同而发生变化，不同个体的同一部位、同一个体的不同部位的皮肤微生物存在一定的差异[7]。
通过对远航舰艇官兵脐周微生物研究发现，脐周病原菌中革兰阳性球菌主要有金黄色葡萄球菌，革兰阴性杆菌主要有产酸克雷伯菌、阴沟肠杆菌和铜绿假单胞菌，真菌主要有热带假丝酵母菌。脐周栖居菌中革兰阳性球菌以凝固酶阴性葡萄球菌为主，包括表皮葡萄球菌、人葡萄球菌和溶血葡萄球菌等。任务中期、后期与前期比较，病原菌和栖居菌分离数量在中期减少，后期增加。医疗组与机电组比较，在任务前期、中期、后期脐周病原菌检出数之间差异有统计学意义，栖居菌检出数之间差异无统计学意义。在任务后期，医疗组脐周病原菌数减少，而机电组脐周病原菌数增加。皮肤上的金黄色葡萄球菌增多与毛囊炎、疖肿、湿疹和手足癣的化脓性感染有关。远航期间，皮肤病已成为舰艇官兵的常见病和高发病[8 - 10]。刘必庆报道[11]，我海军某舰官兵 235 人，连续执行远航任务 8 个月，皮肤病的发病率为 78. 7% ，其中感染性皮肤病占 45. 9% 。因此，研究远航舰艇官兵皮肤细菌的变化特点，对于远航官兵皮肤病的防治具有重要意义。
皮肤细菌与伤口感染密切相关。在远航过程中，由于舰艇内外环境存在对身体诸多不良因素，如高温、高湿、噪声、颠簸及有害化学物质危害，舰艇活动空间狭小、居住拥挤，舱室内空气差，淡水管制，新鲜蔬菜补给困难，个人卫生和饮食营养卫生条件受限，舰员体力消耗大，精神处于高度紧张和疲劳状态，身体抵抗力下降，皮肤上正常栖居菌减少，而致病菌增多，一旦发生外伤就会增加感染的机会。创伤是致病菌的主要入侵途径，皮肤表面的细菌( 如金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、阴沟肠杆菌和铜绿假单胞菌等) 是创伤感染的重要来源。此外，战伤合并海水浸泡后的感染也与皮肤表面的细菌有关，海战伤感染往往是由皮肤细菌、肠道细菌和海水细菌造成的混合感染，使感染时限提前，炎症反应加重[12]。因此，开展远航舰艇官兵皮肤细菌变化的研究将为平时外伤感染和战伤合并海水浸泡后感染的及时救治提供可靠依据。——论文作者：韩善桥，赵晓航，何立东，乔媛媛，付凯飞
参考文献
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[10] 王志勇. 海军舰艇人员癣疾病调查分析[J]. 海军医学杂志， 2000，21( 3) : 268 - 269.
[11] 刘必庆. 海军某部远航官兵皮肤病发病情况分析[J]. 海军医学杂志，2011，32( 1) : 9 - 11.
[12] 韩善桥，虞积耀，姜涛，等. 创伤合并海水浸泡动物感染实验研究[J]. 实用预防医学，2011，18( 8) : 1533 - 1535.
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